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上海新西蘭兔原代肝細胞貼壁

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原代肝細胞也可以用于Organ-on-a-chip的構建。Organ-on-a-chip是一項創(chuàng )新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構建了一個(gè)完整的生理組織微系統,其中包含有原代肝細胞、肝非實(shí)質(zhì)細胞、生物流體和機械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結構功能特征和復雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評價(jià)、藥物安全性評價(jià)、化妝品安全性評價(jià)、食品安全性評價(jià)、環(huán)境保護評價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對傳統的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng )新的基礎上實(shí)現的。傳統的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗或體外細胞培養的方法,但這些方法存在著(zhù)很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗不僅存在著(zhù)倫理和道德問(wèn)題,而且還存在著(zhù)種屬差異、生理反應差異等問(wèn)題;而體外細胞培養則存在著(zhù)細胞失活、細胞分化等問(wèn)題。因此,Organ-on-a-chip的出現,填補了這些傳統方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應用提供了更加可靠和有效的手段。立沃生物原代肝細胞配套有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團隊,對后續的細胞復蘇,培養,實(shí)驗開(kāi)展提供強有力的技術(shù)保障。上海新西蘭兔原代肝細胞貼壁

上海新西蘭兔原代肝細胞貼壁,原代肝細胞

原代肝細胞的體外培養和研究有著(zhù)很大的應用范圍。原代肝細胞(Primary hepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養的肝細胞。原代肝細胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留和維持了肝細胞的完整形態(tài)和肝細胞體外代謝活性,真實(shí)反應了體內的代謝情況。3.隨著(zhù)技術(shù)水平的不斷提高,原代培養的動(dòng)物和人肝細胞已廣泛應用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對肝臟中細胞色素P450酶誘導作用并探討其誘導機制;6.預測和解釋藥物與藥物之間的相互作用;7.研究藥物的細胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細胞體外培養和研究的相關(guān)技術(shù)對于提升相關(guān)試驗的成功率非常有幫助。浙江牛原代肝細胞培養基原代肝細胞是一種重要的研究工具,可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。

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原代肝細胞是藥物的毒性研究的重要組成部分。藥物通過(guò)肝臟代謝后,大多數藥物的毒性被消除,但同時(shí)也有一些無(wú)毒或低毒的物質(zhì)通過(guò)生物轉化后轉變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細胞即為一個(gè)較好的篩選模型,尤其是在檢測結構相關(guān)化合物時(shí),原代肝細胞的角色更為重要。人原代肝細胞是重要的體外模型。人原代肝細胞在較大程度上保留了細胞在體內organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內的肝細胞極其相似,是較為接近臨床的一種標準體外短期培養模型。人原代肝細胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時(shí)進(jìn)行研究或者凍存待用。原代肝細胞是肝臟疾病的研究以及相應藥物的開(kāi)發(fā)的重要載體。比如一些對于乙肝病毒的研究需要對肝細胞進(jìn)行體外培養;一些嚴重肝臟疾病的細胞移植研究也要涉及到對原代肝細胞進(jìn)行大量擴增。因此,原代肝細胞的體外培養和研究是一直以來(lái)科學(xué)家們關(guān)注的熱點(diǎn)。

保存溫度是影響原代肝細胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來(lái)說(shuō),原代肝細胞的保存溫度為4℃,但是在這種溫度下,細胞的代謝活動(dòng)仍然會(huì )繼續進(jìn)行,導致細胞的壽命有限。因此,為了延長(cháng)原代肝細胞的壽命,可以將其保存在低溫下,如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細胞的代謝活動(dòng),延長(cháng)細胞的壽命,但是在保存過(guò)程中需要注意加入凍存液,防止細胞凍結損傷。原代肝細胞的運輸也是一個(gè)重要的問(wèn)題。在運輸過(guò)程中,細胞可能會(huì )受到振動(dòng)、溫度變化、氧氣和營(yíng)養物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,導致細胞失活或功能受損。為了保證細胞的完整性和功能性,可以采用液氮運輸的方式,即在低溫下運輸細胞。在運輸前給細胞提供充足的營(yíng)養和氧氣,也可以增強其抵抗不利因素的能力。人原代肝細胞的獲取和保存非常困難,且存在批次差異和有限的增殖能力,因此在實(shí)際應用中受到了一定的限制。

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在原代肝細胞培養過(guò)程中,如何檢測污染情況?在原代肝細胞培養過(guò)程中,檢測污染情況是非常重要的,可以通過(guò)以下幾種方法進(jìn)行檢測:1.肉眼觀(guān)察:通過(guò)肉眼觀(guān)察培養物的外觀(guān)、顏色、透明度等是否異常,如果出現渾濁、變色、沉淀等異常情況,可能是污染所致。2.顯微鏡觀(guān)察:使用顯微鏡觀(guān)察培養物中的細胞形態(tài)、數量、分布等是否異常,如果出現細胞變形、破裂、死亡等異常情況,可能是污染所致。3.細菌培養:將培養物接種到細菌培養基中,觀(guān)察是否有細菌生長(cháng),如果有細菌生長(cháng),說(shuō)明培養物受到了細菌污染。:使用PCR技術(shù)檢測培養物中的細菌、病毒等微生物的DNA,如果檢測到DNA存在,說(shuō)明培養物受到了污染??傊?,在原代肝細胞培養過(guò)程中,需要定期進(jìn)行污染檢測,及時(shí)發(fā)現和處理污染,以保證培養物的質(zhì)量和實(shí)驗結果的準確性。立沃生物原代肝細胞可以用于肝臟疾病研究、藥物代謝和藥物毒性、篩選藥物和測試藥物的毒性等方面的研究。廣州小鼠原代肝細胞分離培養

懸浮肝細胞主要應用于藥物代謝研究,一般使用多供體混合懸浮肝細胞,適用于試驗周期比較短的實(shí)驗。上海新西蘭兔原代肝細胞貼壁

原代肝細胞的融合度是影響其生長(cháng)和增值能力的重要因素之一。當融合度達到70%以上時(shí),細胞開(kāi)始進(jìn)入高度同步狀態(tài),細胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮,從而促進(jìn)了細胞的生長(cháng)和增殖。但是,如果融合度低于70%,細胞之間的相互作用就會(huì )受到限制,導致細胞的增值能力受到限制,無(wú)法達到100%。此外,細胞之間的距離也是影響細胞生長(cháng)和增值能力的重要因素之一。當細胞之間的距離剛好是黃金分割點(diǎn)時(shí),細胞開(kāi)始進(jìn)入高度同步狀態(tài),細胞之間的相互作用也得到了有效的發(fā)揮,從而促進(jìn)了細胞的生長(cháng)和增殖。但是,如果細胞之間的距離超過(guò)了黃金分割點(diǎn),細胞就無(wú)法進(jìn)入高度同步狀態(tài),從而導致細胞的增值能力受到限制。細胞的培養密度也是影響細胞生長(cháng)和增值能力的重要因素之一。低密度培養雖然可以保持細胞的功能,但是細胞的增值能力會(huì )很快丟失。而高密度培養可以維持細胞的功能一段時(shí)間,但是也會(huì )導致細胞之間的相互作用受到限制,從而影響細胞的生長(cháng)和增殖。因此,在進(jìn)行原代肝細胞的培養時(shí),需要根據實(shí)際情況選擇適當的培養密度,以保證細胞的生長(cháng)和增值能力得到正常的發(fā)揮。上海新西蘭兔原代肝細胞貼壁

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