安徽專(zhuān)業(yè)抗體補給公司
免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細胞的 過(guò)程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射。 抗原通過(guò)血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫部位,刺激相應B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細胞。細胞融合采用二氧化碳氣體處死小鼠,無(wú)菌操作取出脾臟,在平皿內擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細胞??贵w通過(guò)與細菌或病毒表面的抗原結合來(lái)阻止它們進(jìn)一步侵襲機體。安徽專(zhuān)業(yè)抗體補給公司
抗體結構域:輕鏈有VL和CL兩個(gè)結構域;IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個(gè)結構域;IgM和IgE的重鏈有五個(gè)結構域,即多一個(gè)CH4結構域。每個(gè)結構域由約110個(gè)氨基酸組成,氨基酸序列具有相似性,其二級結構是由幾條多肽鏈折疊形成的兩個(gè)反向平行的β片層(anti-parallel β sheet)構成的,兩個(gè)β片層中心的兩個(gè)半胱氨酸殘基由一個(gè)鏈內二硫鍵垂直連接,形成一個(gè)“β桶狀(βbarrel)”或“β-三明治 (β sandwich)”結構,這種折式稱(chēng)為免疫球蛋白折疊(immunoglobulin folding)。許多膜型和分泌型的蛋白質(zhì)分子也含有這類(lèi)獨特折疊的二級結構,因此,這類(lèi)分子被統稱(chēng)為免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)。山東IgG抗體補給公司重組抗體技術(shù)使得科學(xué)家能夠定制和改良抗體,以應對不同的疾病挑戰。
抗體IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應受體的細胞結合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。調理作用(opsonization)指IgG抗體(特別是IgG1和IgG3)的Fc段與中性粒細胞、巨噬細胞表面相應的Fc受體結合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用。例如,細菌特異性的IgG抗體可通過(guò)其Fab段與相應的細菌抗原結合后,以其Fc段與巨噬細胞或中性粒細胞表面相應的Fc受體結合,通過(guò)IgG的Fab段和Fc段的“橋聯(lián)”作用,促進(jìn)吞噬細胞對細菌的吞噬??贵w依賴(lài)的細胞介導的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)指具E有殺傷活性的細胞(如NK細胞)通過(guò)其表面的Fc受體識別包被于靶細胞表面抗原(如病毒感染細胞或腫瘤細胞)上的抗體的Fc段,直接殺傷靶細胞。NK細胞是介導ADCC的主要細胞??贵w與靶細胞上的抗原結合是特異性的,而表達Fc受體細胞的殺傷作用是非特異性的 。
抗體水解片段:在一定條件下,Ig分子肽鏈的某些部分易被蛋白酶水解為不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的兩種Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的結構和功能,分離和純化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在鉸鏈區二硫鍵連接的兩條重鏈的近N端,可將Ig裂解為兩個(gè)完全相同的Fab段和一個(gè)Fc段。Fab段即抗原結合片段(fragment antigenbinding,Fab),由一條完整的輕鏈與重鏈的VH和CHl結構域組成。一個(gè)Fab片段為單價(jià),可與抗原結合但不產(chǎn)生凝集反應或沉淀反應;Fc段即可結晶片段(fragment crystallizable,Fc),由Ig的CH2和CH3結構域組成。Fc段無(wú)抗原結合活性,是Ig與效應分子或細胞相互作用的部位??贵w按其反應形式分為凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、調理素、中和抗體、補體結合抗體等。
IgE是什么?與過(guò)敏有什么關(guān)系?IgE是如何參與過(guò)敏反應:IgE的尾巴則和效應細胞(肥大細胞、嗜堿性粒細胞)粘住。上述過(guò)程稱(chēng)為“致敏”。游離狀態(tài)的IgE抗體半衰期是2-3天,如果長(cháng)期不接觸變應原,致敏狀態(tài)可逐漸消失。但是,當此過(guò)敏原再次進(jìn)入機體后,人體免疫系統就立即被認識它的IgE抓住,IgE的尾巴給肥大細胞報信,細胞釋放組胺等炎性介質(zhì),使血管擴張,腺體分泌增加等,作用于組織部位,從而引發(fā)各種過(guò)敏癥狀。在各類(lèi)過(guò)敏性疾病中,IgE與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面的特異性受體結合,導致細胞信號啟動(dòng),因此在過(guò)敏體質(zhì)或超敏患者中,血清中總IgE水平明顯高于健康人群??贵w的產(chǎn)生主要由B細胞負責,它們可以識別并生成特異性的抗體以應對傳染。山東IgG抗體補給公司
特定的抗體可以用于制備特異性的試劑盒,用于檢測特定病原體或標志物。安徽專(zhuān)業(yè)抗體補給公司
抗體主要功能:?jiǎn)?dòng)補體產(chǎn)生攻膜復合物使細胞溶解破壞。人IgG1~3和IgM與相應抗原結合后,可因構象改變而使其CH2和CH3結構域內的補體結合點(diǎn)暴露,從而通過(guò)經(jīng)典途徑啟動(dòng)補體系統,產(chǎn)生多種效應功能,其中IgM、IgG1和IgG3啟動(dòng)補體系統的能力較強,IgG2較弱。IgA、IgE和IgG4本身難以啟動(dòng)補體,但在形成聚合物后可通過(guò)旁路途徑啟動(dòng)補體系統。通常情況下,lgD不能啟動(dòng)補體。調理吞噬和ADCC:IgG可通過(guò)其Fc段與表面具有相應受體的細胞結合,產(chǎn)生不同的生物學(xué)作用。安徽專(zhuān)業(yè)抗體補給公司
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